Bakteriyel endotoksin tespiti
Bakteriyel endotoksin test hizmetleri sunuyoruz. Test yöntemlerimiz, jel-pıhtı endotoksin testi TAL ve LAL yöntemleri de dahil olmak üzere tüm farmakope gereksinimlerini (USP85, ChP1143) karşılamaktadır. Ayrıca müşterilerimize girişim doğrulama deneyleri ve teknik destek hizmetleri de sağlıyoruz.
Aseptik muayene
Doğrudan aşılama ve membran filtrasyon yöntemleri, canlı kirletici mikroorganizmaların bulunmadığından emin olmak için tasarlanmış ürünler için klasik sterilite testleridir. Bu testler bir izolatör veya temiz oda ortamında gerçekleştirilir. Test yöntemlerimiz tüm farmakope gerekliliklerini karşılamaktadır (USP71, ChP1101).
• Aerobik ve anaerobik mikroorganizmaları tespit etmek için test numuneleri doğrudan iki kültür ortamına inoküle edilir.
• Aşılamanın ardından her iki kültür ortamı da 14 gün süreyle inkübe edilir. Mikrobiyal büyümenin kanıtını tespit etmek için aralıklı gözlem ve test süresinin sonunda son bir gözlem yapılır.
• Steril kapalı filtreleme cihazı, eşit hacimde test numunelerinin iki membran filtreden aynı anda filtrelenmesine olanak sağlar.
• Aerobik ve anaerobik mikroorganizmaların tespitini kolaylaştırmak için numuneler 14 gün boyunca iki kültür ortamında inkübe edilir.
Mikoplazma Testi
Mikoplazma kontaminasyonu hücre kültüründe yaygın bir sorundur. Konuyu daha da karmaşık hale getiren kirletici maddeler, bulanıklık veya sitopatik etkiler göstermeden yüksek titrelere kadar büyüyebilir, bu da tespit edilmesini özellikle zorlaştırır. Biyofarmasötik üretiminde kullanılan hücre substratlarının mikoplazma da dahil olmak üzere tesadüfi ajanlardan arınmış olduğu kanıtlanmalıdır. Mikoplazma testi, hammaddeler, hücre bankaları, virüs tohum stokları, işlenmemiş toplu hasat malzemeleri ve nihai ürünler dahil olmak üzere ürün geliştirmenin tüm aşamalarında gerçekleştirilmelidir.
Doğrudan kültür yöntemi
Test numuneleri doğrudan agar plakalarına/yarı-sıvı besiyerine ve sıvı besiyerine aşılanır.
Seçilen agar/yarı-sıvı ve sıvı besiyerinin, birden fazla mikoplazma türünün büyümesini destekleyen iyi büyümeyi-teşvik eden özelliklere sahip olduğu kanıtlanmıştır.
Her mikoplazma tespit testi, test sisteminin uygunluğunu doğrulamak için negatif ve pozitif kontroller içerir.
Kuluçka dönemi sırasında, mikoplazma büyümesini gözlemlemek için sıvı kültürler birden fazla zaman noktasında alt kültüre tabi tutulur.
İnkübasyon süresinin sonunda mikoplazma kontaminasyonu, agar plakaları üzerinde mikoplazma kolonilerinin varlığı veya sıvı besiyerindeki renk değişimi gözlemlenerek değerlendirilir.
Toplam kuluçka süresi 28 gündür.
Gösterge hücre kültürü yöntemi
Bazı mikoplazma suşları, standart kültür ortamında çoğalmadıkları için "kültürlenemez" olarak kabul edilir. Vero hücrelerinin kültürleri bu mikoplazma suşlarının zenginleştirilmesi için kullanılabilir. Bir-haftalık kültür periyodundan sonra hücreler sabitlenir, DNA-bağlayıcı floresan boyalarla boyanır ve mikroskop altında değerlendirilir.
Mikoplazma enfeksiyonu vakalarında, kontaminasyon şiddetli olduğunda hücre yüzeyinde ve çevresindeki alanda karakteristik bir parlak floresans modeli ortaya çıkar.
Protein, peptid, vektör ve plazmit ürünleri çevresel faktörlere karşı özellikle duyarlıdır. Stabilite testi çalışmaları, biyofarmasötik ürünlerin performansını belirli bir zaman dilimi içerisinde farklı çevresel koşullar altında değerlendirmek için kullanılır. Sonuçlar, ilaçlar ve ürünler için önerilen depolama ve taşıma koşullarını belirler ve uygun raf-ömrünü veya yeniden test sürelerini belirler.
Gerçek-zamanlı ve hızlandırılmış kararlılık testleri
Raf ömrü genellikle gerçek-zamanlı stabilite testi ve hızlandırılmış stabilite testinin sonuçlarına göre tahmin edilir. Gerçek zamanlı stabilite testinde ürün, önerilen depolama koşullarında saklanır ve ürün spesifikasyonlarını karşılayamayana kadar sürekli olarak izlenir. Hızlandırılmış stabilite testinde ürün, yüksek stres koşulları (örneğin yüksek sıcaklık ve/veya nem) altında saklanır. Önerilen depolama koşulları altında bozulma, hızlanma faktörü ile bozunma profilleri oranı arasındaki bilinen ilişki kullanılarak tahmin edilebilir.
Zorunlu Bozunma Çalışmaları
Zorunlu bozunma çalışmaları, bozunma oranlarını hızlandırmak için aşırı depolama koşulları altında stabilite çalışmaları yoluyla yürütülür. Protein bozunma kinetiğinin doğrusal olmayan doğası nedeniyle, bu çalışmaların biyofarmasötik ürünlerin raf ömrüne ilişkin tahmin değeri sınırlıdır. Bununla birlikte, zorunlu bozunma çalışmaları, erken-aşama ilaç geliştirmede özellikle faydalıdır çünkü bunlar, ürünün parçalanması ve bozunma yolları hakkında bilgi sağlayarak formülasyon optimizasyonuna izin verir ve ürün stabilitesini kontrol etmek için depolama koşullarının belirlenmesine yardımcı olur.
Uzun-Dönem Stabilite Çalışmaları
Biyofarmasötik ürünler için, uzun-vadeli stabilite çalışmaları beklenen depolama koşullarında yürütülürken, kısa-vadeli çalışmalar kullanım içi stabilite değerlendirmelerini desteklemek için daha yüksek sıcaklıklarda ve taşıma koşullarında yürütülür.